Što je PCR analiza?
Analiza lančane reakcije polimeraze (PCR) je laboratorijska tehnika osmišljena tako da identificira male količine DNA u uzorku postupkom poznatim kao pojačanje . Tijekom PCR amplifikacije, DNK od interesa je kopiran više puta sve dok je dovoljno za analizu i detekciju. Na primjer, PCR se može koristiti za prepoznavanje malih količina DNA iz organizama koji uzrokuju gonoreju ili klamidiju prisutni u uzorku urina .
Kako PCR radi?
Prvi korak u PCR je zagrijavanje uzorka tako da dvolančana DNA odvoji na dva pojedinačna niza - to se naziva denaturacija . Zatim se primeri , kratki uzorci DNA koji se podudaraju do krajeva DNA sekvence od interesa, kombiniraju s DNA uzorka. Nakon toga, DNA polimeraza se koristi za početak replikacije DNA na mjestu primera. Konačno, DNK se zagrijava kako bi se još jednom odvojili niti, a cijeli postupak PCR započinje ponovno.
Količina DNA segmenta interesa prisutnog u uzorku raste eksponencijalno sa svakim PCR ciklusom: jedna kopija postaje dva, a zatim postaje četiri, a zatim postaje osam, itd; pa općenito, potrebno je samo 20 do 40 ciklusa kako bi se utvrdilo je li dotična DNA prisutna (i, ako jest, osigurati dovoljan uzorak za analizu).
Svi koraci lančane reakcije polimeraze - denaturirajući DNA, primjenjuju se primeri i produžuju DNK - ostvaruju se na različitim temperaturama, tako da nakon što se početna smjesa stavi zajedno, koraci se mogu kontrolirati kroz proces poznat kao termocikliranje , u kojem se temperatura održava na potrebnim razinama samo dovoljno dugo da se svaki korak odvija.
Dakle, PCR je učinkovit način pojačavanja količine ciljane DNA u jednoj epruveti s malom potrebom za ljudskom intervencijom.
Polimerazna lančana reakcija predstavljala je revoluciju u biološkoj tehnici kada je prvo razvijena u ranim 1980-ima, a kreator PCR-a, Kary Mullis, osvojio je Nobelovu nagradu za kemiju za svoj rad 1993. godine.
Zašto je PCR relevantan za STD testiranje?
Lančana reakcija polimeraze i srodne tehnike kao što je reakcija lanca ligaza , pokazuju sve veću važnost za STD testiranje. To je zato što te tehnike mogu izravno identificirati male količine virusne DNA ili RNA u uzorcima. Identificiranje genetskog koda patogena ne zahtijeva da patogen bude živ, poput bakterijske kulture ili viralne kulture . Također ne zahtijeva da se infekcija dogodila prije dovoljno dugo da ljudi razviju reakciju protutijela koja se može detektirati (kao što je otkrivena pomoću ELISA ). To znači da PCR tehnike ponekad mogu otkriti bolesti prije drugih testova i bez koliko treba brinuti o održavanju uzoraka na životu ili testiranju točno u pravo vrijeme.